Игумен Почаевского монастыря, подвижник и издатель первой полной Библии на церковнославянском языке родился в 1551 году и прожил ровно сто лет.
Преподобный происходил из Галиции, которая, как и Волынь, в XVI веке подвергалась притеснениям со стороны польско-литовских соседей. На приграничных землях насаждалось католичество и униатство — особая конфессия, созданная для объединения православия и католицизма под управлением единой церкви. В миру преподобного Иова звали Иваном Железо. Он с детства отличался набожностью, а в 10 лет ушел из дома в ближайший Угорницкий монастырь и просил игумена принять его в обитель послушником. Оставшись при монастыре, он быстро заслужил любовь братии своей скромностью и трудолюбием, а мудрый игумен, прозревая в мальчике дар духовного подвижничества, в 11 лет разрешил ему постричься в монахи с именем Иов. Всего годом позже он сделал Иова иеромонахом. Когда преподобный принял схиму, он вновь стал называться Иоанном, но в истории церкви остался под своим первым монашеским именем.
Уже пребывая в сане священника, Иов окормлял многих знатных людей Галицко-Волынской земли, слух о его доброте и прозорливости широко разошелся от Угорницкого монастыря. Известный защитник православия от притеснений западных церквей князь Константин Острожский испытывал к нему особое доверие и уважение. Он попросил игумена отпустить преподобного Иова в Крестовоздвиженский монастырь у города Дубно, который пользовался его покровительством. Иов отправился туда около 1580 года и через некоторое время был поставлен игуменом. Он управлял Дубенской обителью более 20 лет, стойко выдерживая все более и более обострявшееся давление поляков и литовцев. В конце концов, устав от борьбы, он в 1604 году удалился в одиночестве на Почаевскую гору, где поселился в пещере и предался аскезе. Узнав о подвижнике, монахи находившегося поблизости старинного Почаевского успенского монастыря стали приходить к келье Иова, принося ему пищу и прося наставления. Он никогда не отказывал никому в беседе и совете, и в конце концов, после смерти Почаевского игумена, иноки уговорили Иова занять его место.
Неустанно заботясь о благе монастыря, преподобный Иов сам работал наравне с братией, занимался укреплением плотин у монастыря, сажал в саду деревья. Он ввел в обители общежитский устав, а на его территории начал масштабные строительные работы: за время 50-летнего правления игумена Иова в монастыре были возведены новые крепкие стены и построен Свято-Троицкий собор, а затем еще шесть церквей. Но самой важной частью его деятельности было просвещение и книгопечатание. Он руководил типографией князя Константина, в которой работал печатник Иван Федоров, подготовил и выпустил первое полное издание Священного Писания на славянском языке, переводил и издавал труды отцов церкви.
Перу самого преподобного Иова Почаевского принадлежит 80 бесед, проповедей и поучений, а также обширное собрание выписок из аскетических и полемических святоотеческих сочинений. Они были собраны в книге, первоначально названной «Книга Иова Железа, игумена Почаевского, властною его рукою написанная». Оригинал ее не сохранился, однако в 1884 году она была переиздана под названием «Пчела почаевская».
В возрасте 98 лет игумен Иов назначил себе преемника, и еще два года прожил, активно участвуя в делах монастыря. Осенью 1651 года ему было откровение, что через семь дней он отдаст Богу душу. Он предупредил братию и в указанный срок, 9 ноября отошел в мир иной. Мощи святого были обретены нетленными в 1659 году. Однако они были вновь захоронены, и повторно вскрыты только 28 августа 1833 года (10 сентября по новому стилю), по решению Святейшего Синода. Именно этот день был избран для прославления и ежегодного поминовения преподобного. С 1902 года по постановлению Синода в этот день после божественной литургии честные мощи святого обносят с крестным ходом вокруг Успенского собора Почаевской Лавры.